甘油三酯（ TG） 含量檢測試劑盒說明書
注意：正式測定之前選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預測定。
規格：100T/96S 產品內容：
試劑一：自備，取玻璃空瓶，加入 60mL 正庚烷，60mL 異丙醇，蓋緊后混勻，4℃保存。
試劑二：液體 3mL×1 瓶，4℃保存。試劑三：液體 10mL×1 瓶，4℃保存。
試劑四：液體 3mL×1 瓶，4℃避光保存。試劑五：液體 10mL×1 瓶，4℃避光保存。試劑六：液體 10mL×1 瓶，4℃避光保存。
標準品：粉劑×1 瓶，臨用前加 5mL 試劑一，即 1mg/mL 甘油三酯標準溶液，4℃保存。
產品說明：
TG 是長鏈脂肪酸和甘油形成的脂肪分子，不僅是細胞膜的主要成分，也是重要呼吸底物。 測定原理： 用異丙醇抽提取 TG，KOH 皂化 TG 后水解生成甘油及脂肪酸，過碘酸氧化甘油生成甲醛， 在氯離子存在下甲醛與乙酰丙酮縮合生成黃色物質，在 420 nm 有特征吸收峰，其顏色的深淺與 TG 含量成正比。
自備儀器和用品：
可見分光光度計/酶標儀、微量比色皿/96 孔板、水浴鍋、可調式移液槍、雙蒸水、125mL 玻璃空瓶。
操作步驟:
一、TG 的提取：
1、 組織：按照組織質量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL 試劑一）進行冰浴勻漿，8000g，4℃離心10min，取上清待測。
2、 細胞、細菌：先收集 400-500 萬細胞或細菌到離心管內，棄上清，加 1mL 試劑一，超聲波破碎
1min（強度 20％，超聲 2s，停 1s），8000g， 4℃離心 10min，取上清待測。
3、 血清（漿）等液體樣品：直接測定。二、測定操作：
1.分光光度計/酶標儀預熱 30min，調節波長到 420 nm，蒸餾水調零。
2.水浴鍋預熱到 65℃。
空白管標準管測定管
雙蒸水（µL）40
標準液（µL）40
TG 待測液（µL）40
試劑一（µL）125125125
試劑二（µL）252525
加試劑一后充分混勻，再加試劑二，劇烈振蕩 30s，靜置，待分層后取上層溶液 15µL，置于新的 EP 管中。
3.甘油三酯含量測定：
空白管標準管測定管
上層溶液（µL）151515
試劑三 （µL）505050
試劑四（µL）151515
充分混勻，65℃水浴 3min
試劑五（µL）505050
試劑六（µL）505050
充分混勻，65℃水浴 15min
轉移至微量比色皿/96 孔板測定 420nm 處吸光度，記為 A 空，A 標和 A 測。注意：空白管和標準管只需測定一次。
三、計算公式：
1.血清（漿）中甘油三酯含量：
TG 含量（mg/dL）=C 標準品×（A 測－A 空）÷（A 標－A 空）
=（A 測－A 空）÷（A 標－A 空）
C 標準品：1mg/mL；100：單位換算系數，1dL=100 mL。
2.組織中甘油三酯含量：
(1)按樣本蛋白濃度計算
TG 含量（mg/ mg prot）= C 標準品×V×（A 測－A 空）÷（A 標－A 空）÷（Cpr×V）
=（A 測－A 空）÷（A 標－A 空）÷ Cpr
(2)按樣本鮮重計算
TG 含量（mg/ g 鮮重）=C 標準品×V×（A 測－A 空）÷（A 標－A 空）÷W
=（A 測－A 空）÷（A 標－A 空）÷ W
C 標準品：1mg/mL ；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W：樣本鮮重，g；V：加入試劑一的體積，
1mL。
3.細胞、細菌中甘油三酯含量：
TG 含量（mg/104 cell）=C 標準品×（A 測－A 空）÷（A 標－A 空）÷細菌或細胞密度
=（A 測－A 空）÷（A 標－A 空）÷細菌或細胞密度
C 標準品：1mg/mL；細菌或細胞密度：104 cell /mL。
注意事項：
1.試劑盒中有易揮發性物質，實驗過程中需佩戴手套和口罩，試劑瓶蓋打開后應該及時蓋緊。
2.加試劑二后需劇烈震蕩，使待測液中甘油三酯得到充分提取。
3.最低檢出限為 100µ mol/L。
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